15版藥典與20版藥典內(nèi)容對比

 

 

【15版】......當本法用于檢查非無菌制劑及其原、輔料等是否符合相應(yīng)的微生物限度標準時，應(yīng)按下述規(guī)定進行檢驗，包括樣品的取樣量和結(jié)果的判斷等。

【20版】......當本法用于檢查非無菌制劑及其原、輔料等是否符合相應(yīng)規(guī)定的微生物限度標準時，應(yīng)按下述規(guī)定進行檢驗，包括樣品的取樣量和結(jié)果的判斷等。

 

【15版】......單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期進行監(jiān)測。

【20版】......單向流潔凈空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期進行監(jiān)測。

 

 

【15版】菌液制備：

取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入3~5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的黑曲霉孢子懸液。

【20版】菌液制備：

取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入3~5ml適量含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的黑曲霉孢子懸液。

 

 

【15版】微生物計數(shù)用的成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配置的培養(yǎng)基均應(yīng)進行培養(yǎng)基適用性檢查。

【20版】微生物計數(shù)用的成品商品化的預(yù)制培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配置的培養(yǎng)基均應(yīng)進行培養(yǎng)基適用性檢查。

 

 

【15版】

...... 1.供試液制備......

【20版】

取消序號

（4）需用特殊方法制備供試液的供試品

 

 

【15版】氣霧劑，噴霧劑供試品   取供試品，置-20℃或其他適宜溫度冷凍約1小時，取出，迅速消毒供試品開啟部位，用無菌鋼錐在該部位鉆一小孔，放至常溫，并輕輕轉(zhuǎn)動容器，使拋射劑緩緩全部釋出。供試品亦可采用其他適宜的方法取出。用無菌注射器從每一容器中吸出藥液于無菌容器中混合，然后取樣檢測。

【20版】氣霧劑，噴霧劑供試品   取供試品，置-20℃或其他適宜溫度冷凍約1小時，取出，迅速消毒供試品開啟部位或閥門，正置容器，用無菌鋼錐或針樣設(shè)備在該部位與閥門結(jié)構(gòu)相匹配的適宜位置鉆一小孔，放至常溫供試品各容器的鉆孔大小和深度應(yīng)盡量保持一致，拔出鋼錐時應(yīng)無明顯拋射劑拋出，并輕輕轉(zhuǎn)動容器，使拋射劑緩緩全部釋出。亦可采用專業(yè)設(shè)備釋出拋射劑。釋放拋射劑后再無菌開啟容器，并將供試品轉(zhuǎn)移至無菌容器中混合，必要時用沖洗液沖洗容器內(nèi)壁。供試品亦可采用其他適宜的方法取出。用無菌注射器從每一容器中吸出藥液于無菌容器中混合，然后取樣檢測。

 

 

【15版】 貼膏劑供試品   取供試品，去掉防粘層，將粘貼面朝上放置在無菌玻璃或塑料器皿上，在粘貼面上覆蓋一層適宜的無菌多孔材料（如無菌紗布），避免貼膏劑粘貼在一起。將處理后的貼膏劑放入盛有適宜體積并含有表面活性劑（如聚山梨酯80或卵磷脂）稀釋液的容器中，震蕩至少30分鐘。必要時，用同一稀釋液將供試品進一步10倍系列稀釋。

【20版】貼劑，貼膏劑供試品   取供試品，去掉防粘層，將粘貼面朝上放置在無菌玻璃或塑料器皿上，在粘貼面上覆蓋一層適宜的無菌多孔材料（如無菌紗布），避免貼膏劑供試品粘貼在一起。將處理后的貼膏劑供試品放入盛有適宜體積并含有表面活性劑（如聚山梨酯80或卵磷脂）稀釋液的容器中，震蕩至少30分鐘。必要時，用同一稀釋液將供試品進一步10倍系列稀釋。

 

 

【15版】

2.接種和稀釋

按下列要求進行供試液的接種和稀釋，制備微生物回收試驗用供試液。

【20版】

2.接種和稀釋

按表1規(guī)定及下列要求進行供試液的接種和稀釋，制備微生物回收試驗用供試液。

 

 

【15版】

2.菌液對照組

【20版】

取消序號

 

 

【15版】

3.抗菌活性的去除或滅活

......若使用中和劑或滅活劑，實驗中應(yīng)設(shè)中和劑或滅活劑對照組，即取相應(yīng)量稀釋液替代供試品同實驗組操作，以確認其有效性和對微生物無毒性。...

【20版】

3.抗菌活性的去除或滅活

......若使用中和劑或滅活劑，實驗中應(yīng)設(shè)中和劑或滅活劑對照組，即取相應(yīng)量含中和劑或滅活劑的稀釋液替代供試品同實驗組操作，以確認其有效性和對微生物無毒性。......

 

 

【15版】涂布法 取15-20ml溫度不超過45℃的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。

【20版】涂布法 取15-20ml適量（通常為15-20ml）溫度不超過45℃的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。

 

 

【15版】 薄膜過濾法  總沖洗量不得超過1000ml，以避免濾膜上的微生物受損傷。

【20版】 薄膜過濾法  總沖洗量一般不超過500ml，最多不得超過1000ml，以避免濾膜上的微生物受損傷。

 

【15版】 MPN法   接種管置30~35℃培養(yǎng)3天，逐日觀察各管微生物生長情況。如果由于供試品的原因使得結(jié)果難以判斷，可將該管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基或胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，在相同條件下培養(yǎng)1~2天，觀察是否有微生物生長。根據(jù)微生物生長的管數(shù)從表3查被測供試品每1g或每1ml中需氧菌總數(shù)的最可能數(shù)。

【20版】 MPN法   接種管置30~35℃培養(yǎng)不超過3天，逐日觀察各管微生物生長情況。如果由于供試品的原因使得結(jié)果難以判斷，可將該管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基或胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，在相同條件下培養(yǎng)1~2天，觀察是否有微生物生長。根據(jù)微生物生長的管數(shù)從表3查被測供試品每1g，1ml或10cm²每1ml中需氧菌總數(shù)的最可能數(shù)。

 

 

【15版】 表3  微生物最可能數(shù)檢索表

每管含樣品的g或ml數(shù)

MPN/g或ml

注：表內(nèi)所列檢驗量如改用1g（或ml）、0.1g（或ml）、和0.01g（或ml）時，表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)降低10倍；改用0.01g（或ml）、0.001g（或ml）、和0.0001g（或ml）時，表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)增加10倍，其余類推。

【20版】 表3  微生物最可能數(shù)檢索表

每管含樣品的g，ml或ml10cm²數(shù)

MPN/g，ml或ml10cm²數(shù)

注：表內(nèi)所列檢驗量如改用1g（或ml、10cm²）、0.1g（或ml、10cm²）、和0.01g（或ml、10cm²）時，表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)降低10倍；改用0.01g（或ml、10cm²）、0.001g（或ml、10cm²）、和0.0001g（或ml、10cm²）時，表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)增加10倍，其余類推。

 

 

 

【15版】 檢驗量 除另有規(guī)定外，一般供試品的檢驗量為10g或10ml；膜劑為100cm²；貴重藥品，微量包裝藥品的檢驗量可以酌減。檢驗時，應(yīng)從2個以上最小包裝單位中抽取供試品，大蜜丸還不得少于4丸，膜劑還不得少于4片。

【20版】 檢驗量 除另有規(guī)定外，一般供試品的檢驗量為10g或10ml；膜劑、貼劑、貼膏劑為100cm²；貴重藥品，微量包裝藥品的檢驗量可以酌減。檢驗時，應(yīng)從2個以上最小包裝單位中抽取供試品，大蜜丸還不得少于4丸，膜劑、貼劑、貼膏劑還不得少于4片。

貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗量可以酌減。若供試品處方中每一劑量單位(如片劑、膠囊劑)活性物質(zhì)含量小于或等于1mg,或每1g或每1ml(指制劑)活性物質(zhì)含量低于1mg時,檢驗量應(yīng)不少于10個劑量單位或10g或10ml供試品；若樣品量有限或批產(chǎn)量極小(如:小于1000ml或1000g)的活性物質(zhì)供試品,除另有規(guī)定外,其檢驗量最少為批產(chǎn)量的1%檢驗量更少時需要進行風(fēng)險評估；若批產(chǎn)量少于200的供試品,檢驗量可減少至2個單位；批產(chǎn)量少于100的供試品,檢驗量可減少至1個單位。

 

 

【15版】 供試品檢查3.MPN法

取規(guī)定量供試品，按方法適用性試驗確認的方法進行供試液制備和供試品接種，所有試驗管在30~35℃培養(yǎng)3~5天，如果需要確認是否有微生物生長，按方法適用性試驗確定的方法進行。記錄每一稀釋級微生物生長的管數(shù)，從表3查每1g或1ml供試品中需氧菌總數(shù)的最可能數(shù)。

【20版】 供試品檢查3.MPN法

取規(guī)定量供試品，按方法適用性試驗確認的方法進行供試液制備和供試品接種，所有試驗管在30~35℃培養(yǎng)3~5天，如果需要確認是否有微生物生長，按方法適用性試驗確定的方法進行。記錄每一稀釋級微生物生長的管數(shù)，從表3查每1g或、1ml或10cm²供試品中需氧菌總數(shù)的最可能數(shù)。

原文鏈接：2020版藥典《1105非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計數(shù)法》學(xué)習(xí)筆記。