藥品檢測實驗室日常工作都會圍繞藥典規(guī)定的方法展開，藥典改版也是備受大家關(guān)注。本文通過比對解析的方式，對2020版《中國藥典》9203章節(jié)《藥品微生物實驗室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則》 培養(yǎng)基相關(guān)內(nèi)容和15版藥典進(jìn)行比較，和大家分享。

 

 

 

 

培養(yǎng)基

制備篇

 

【2015版】

1.培養(yǎng)基的制備

微生物實驗室使用的培養(yǎng)基可按處方配制，也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。

 

【2020版】

微生物實驗室使用的培養(yǎng)基可按培養(yǎng)基處方配制，也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基配制。或直接采用商品化的預(yù)制培養(yǎng)基。

商品化的脫水培養(yǎng)基或成品預(yù)制培養(yǎng)基應(yīng)設(shè)立接收標(biāo)準(zhǔn)并進(jìn)行符合性驗收，包括品名、批號、數(shù)量、生產(chǎn)單位、外觀性狀（瓶蓋密封度、內(nèi)容物有無結(jié)塊霉變等），附有處方和使用說明外,還應(yīng)注明、有效期、貯藏條件、適用性檢查試驗的質(zhì)控菌和用途生產(chǎn)商提供的質(zhì)控報告和/或其他相關(guān)材料（如配方變更）。（位置調(diào)整-3-）
    
     解析：“商品化的預(yù)制培養(yǎng)基”在新版藥典出現(xiàn)的次數(shù)較多，成品培養(yǎng)基的使用也將是微生物實驗室的選擇趨勢。

 

【2015版】

在制備培養(yǎng)基時,應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或按單獨配方組分進(jìn)行配制。脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說明，（位置調(diào)整-3-）配制時應(yīng)按使用說明上的要求操作以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求，（位置調(diào)整-4-）結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基不得使用。

脫水培養(yǎng)基或單獨配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下貯藏，如低溫、干燥和避光，所有的容器應(yīng)密封，尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器。商品化的成品培養(yǎng)基除了應(yīng)附有處方和使用說明外,還應(yīng)注明有效期、貯藏條件、適用性檢查試驗的質(zhì)控菌和用途。（位置調(diào)整-3-）

為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠，各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱量，并要求有一定的精確度。配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水。應(yīng)記錄各稱量物的重量和水的使用量。

 

【2020版】

培養(yǎng)基的配制（位置調(diào)整-2-）

在制備培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或按單獨配方組分進(jìn)行配制。脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說明，（位置調(diào)整-3-）配制時應(yīng)按使用說明上的要求操作以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求，（位置調(diào)整-4-）不應(yīng)使用結(jié)塊或、顏色發(fā)生變化或其他物理性狀明顯改變的脫水培養(yǎng)基不得使用。

脫水培養(yǎng)基或單獨配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下貯藏，如低溫、干燥和避光，所有的容器應(yīng)密封，尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器。 

為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠并符合要求，配制時，脫水培養(yǎng)基應(yīng)按使用說明上的要求操作以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求，（位置調(diào)整-4-）自制培養(yǎng)基應(yīng)按配方準(zhǔn)確配制。各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱量應(yīng)達(dá)到相應(yīng)的精確度，配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水。應(yīng)記錄各稱量物的重量和水的使用量。

  解析：文字表述的調(diào)整，大同小異，對稱量要求更合理。

 

【2015版】

配制培養(yǎng)基所用容器不得影響培養(yǎng)基質(zhì)量，一般為玻璃容器。培養(yǎng)基配制所用的容器和配套器具應(yīng)潔凈，可用純化水沖洗以消除清潔劑和外來物質(zhì)的殘留。對熱敏感的培養(yǎng)基如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應(yīng)預(yù)先進(jìn)行滅菌，保證培養(yǎng)基的無菌性。

脫水培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解于水中，再行分裝與滅菌，配制時若需要加熱助溶，應(yīng)注意不要過度加熱，避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其他組分時，加入后應(yīng)充分混勻。

 

【2020版】

配制培養(yǎng)基所用容器不得影響培養(yǎng)基質(zhì)量，一般為玻璃容器。培養(yǎng)基配制所用的容器和配套器具應(yīng)潔凈，可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質(zhì)的殘留。對熱敏感的培養(yǎng)基，如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應(yīng)預(yù)先進(jìn)行滅菌，以保證培養(yǎng)基的無菌性。

配制時,脫水培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解于水中混勻，再行分裝與滅菌，配制時。若需要加熱助溶，應(yīng)注意不要過度加熱，以避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其他組分時，加入后應(yīng)充分混勻。

  解析：“完全溶解混勻”要比“完全溶解于水中”更準(zhǔn)確，側(cè)重混勻過程，保證分裝的均一性。

 

 

 

培養(yǎng)基

滅菌篇

 

【2015版】
  培養(yǎng)基滅菌應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗證的參數(shù)進(jìn)行。商品化的成品培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù)，特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過濾除菌。
 培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件，有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或PH值的改變。因此，培養(yǎng)基應(yīng)采用驗證的滅程序滅菌，培養(yǎng)基滅菌方法和條件，應(yīng)通過無菌性試驗和促生長試驗進(jìn)行驗證。此外，對高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗證，以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過熱，過度滅菌可能會破壞絕大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基促生長的質(zhì)量。滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此，應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性，進(jìn)行全面的滅菌程序驗證。

 

【2020版】

培養(yǎng)基的滅菌

培養(yǎng)基滅菌應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗證的參數(shù)進(jìn)行采用經(jīng)驗證的滅菌程序滅菌。商品化的成品預(yù)制培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù)，特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過濾除菌等技術(shù)。
  培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件，有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH值的改變。因此，培養(yǎng)基應(yīng)采用驗證的滅菌程序滅菌，培養(yǎng)基滅菌方法和條件，應(yīng)可通過無菌性試驗和促生長試驗適用性檢查（或靈敏度檢查）試驗進(jìn)行驗證。此外，對高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗證，以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過熱，過度滅菌可能會破壞絕大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基促生長的質(zhì)量。滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此，應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性，進(jìn)行全面的滅菌程序驗證。此外還應(yīng)關(guān)注滅菌后培養(yǎng)基體積的變化。

  解析：“培養(yǎng)基滅菌應(yīng)采用經(jīng)驗證的滅菌程序滅菌”，企業(yè)應(yīng)按照自己驗證合格的滅菌程序進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌。（對很多企業(yè)的工作量加大，但必不可少），增加了“應(yīng)關(guān)注滅菌后培養(yǎng)基體積的變化”。

 

【2015版】

應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值（冷卻至室溫25℃測定）。若培養(yǎng)基處方中未列出pH值的范圍，除非經(jīng)驗證表明培養(yǎng)基的pH值允許的變化范圍很寬，否則，pH值的范圍不能超過規(guī)定值±02。

制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行下列檢查：容器和蓋子不得破裂，裝量應(yīng)相同，盡量避免形成氣泡，固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪，在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶，不得污染微生物等。應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量、有效期及培養(yǎng)基的無菌檢查。（位置調(diào)整-5-）

 

【2020版】
    應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值（冷卻至25℃左右測定）。若培養(yǎng)基處方中未列出pH值的范圍，除非經(jīng)驗證表明培養(yǎng)基的pH值允許的變化范圍很寬，否則，pH值的范圍不能超過規(guī)定值±02。如需滅菌后進(jìn)行調(diào)整，應(yīng)使用滅菌或除菌的溶液。

  解析：順序調(diào)整，無大的變化，增加滅菌后調(diào)節(jié)PH應(yīng)使用滅菌或除菌的溶液。

 

 

 

培養(yǎng)基

貯藏篇

 

【2015版】

2. 培養(yǎng)基的貯藏
  自配的培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱、批號、配制日期、制備人等信息，并在已驗證的條件下貯藏。商品化的成品培養(yǎng)基標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有名稱、批號、生產(chǎn)日期、失效期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性，生產(chǎn)商和使用者應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用說明書上的要求進(jìn)行貯藏，所采用的貯藏和運輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基最低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù)。

固體培養(yǎng)基滅菌后只允許1次再融化，避免因過度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降或微生物污染。培養(yǎng)基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱，若采用其他溶解方法，應(yīng)對其進(jìn)行評估，確認(rèn)該溶解方法不影響培養(yǎng)基質(zhì)量。融化的培養(yǎng)基應(yīng)置于40~45℃的環(huán)境中，不得超過8小時，使用過的培養(yǎng)基（包括失效的培養(yǎng)基）應(yīng)按照國家污染廢物處理相關(guān)規(guī)定進(jìn)行。（位置調(diào)整-6-）

 

 

【2020版】

培養(yǎng)基的貯藏
  自配的培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱、批號、配制日期、制備人等信息，并在已驗證的條件下貯藏。商品化的成品預(yù)制培養(yǎng)基標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有名稱、批號、生產(chǎn)日期、失效期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性，生產(chǎn)商和使用者應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用說明書上的要求進(jìn)行貯藏，所采用的貯藏和運輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基最低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù)。

   解析：順序調(diào)整較多，無大變化。

 

 

 

培養(yǎng)基

質(zhì)量控制試驗篇

 

【2015版】

3. 培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試驗

所有配制好的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制試驗。實驗室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項目是pH值、適用性檢查試驗、定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期。培養(yǎng)基在有效期內(nèi)應(yīng)依據(jù)適用性檢查試驗確定培養(yǎng)基質(zhì)量是否符合要求。有效期的長短取決于在一定存放條件下（包指容器特性及密封性）的培養(yǎng)基其組成成分的穩(wěn)定性。

除藥典附錄另有規(guī)定外，在實驗室中，若采用已驗證的配制和滅菌程序制備培養(yǎng)基且過程受控，那么同一批脫水培養(yǎng)基的適用性檢查試驗可只進(jìn)行1次。如果培養(yǎng)基的制備過程未經(jīng)驗證，那么每一滅菌批培養(yǎng)基均要進(jìn)行適用性檢查試驗。試驗的菌種可根據(jù)培養(yǎng)基的用途從相關(guān)附錄中進(jìn)行選擇，也可增加生產(chǎn)環(huán)境及產(chǎn)品中常見的污染菌株。

 

【2020版】
  培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試驗

所有配制好的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制試驗。實驗室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項目是pH值、適用性檢查或靈敏度檢查試驗、定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期。培養(yǎng)基在有效期內(nèi)應(yīng)依據(jù)適用性檢查試驗確定培養(yǎng)基質(zhì)量是否符合要求。有效期的長短取決于在一定存放條件下（包指容器特性及密封性）的培養(yǎng)基其組成成分的穩(wěn)定性。

除藥典附錄另有規(guī)定外，在實驗室中，若采用已驗證的配制和滅菌程序制備培養(yǎng)基且過程受控，那么同一批脫水培養(yǎng)基的適用性檢查試驗可只進(jìn)行1次。如果培養(yǎng)基的制備過程未經(jīng)驗證，那么每一滅菌批培養(yǎng)基均要進(jìn)行適用性檢查或靈敏度檢查試驗。試驗的菌種可根據(jù)培養(yǎng)基的用途從相關(guān)附錄通則中進(jìn)行選擇，也可增加生產(chǎn)環(huán)境及產(chǎn)品中常見的污染菌株。

固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化只允許1次再融化，以避免因過度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降或微生物污染。培養(yǎng)基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱，若采用其他溶解方法，應(yīng)對其進(jìn)行評估，確認(rèn)該溶解方法不影響培養(yǎng)基質(zhì)量。融化的培養(yǎng)基應(yīng)置于40~45℃的環(huán)境中，不得超過8小時，使用過的培養(yǎng)基（包括失效的培養(yǎng)基）應(yīng)按照國家污染廢物處理相關(guān)規(guī)定進(jìn)行。（位置調(diào)整-6-）

制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行下列檢查：容器和蓋子不得破裂，裝量應(yīng)相同，盡量避免形成氣泡，固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪，在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶，不得污染微生物等。應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量、有效期及培養(yǎng)基的無菌檢查。（位置調(diào)整-5-）

  解析：大同小異，變化不大，表述更準(zhǔn)確。

 

 

 

培養(yǎng)基

環(huán)境監(jiān)測篇

 

【2015版】

用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基須特別防護(hù)，最好要雙層包裝和終端滅菌，如果不能采用終端滅菌的培養(yǎng)基，那么在使用前應(yīng)進(jìn)行100%的預(yù)培養(yǎng)，以防止外來的污染物帶到環(huán)境中及避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果

 

【2020版】

用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基須特別防護(hù)，最好要雙層包裝和終端滅菌，如果不能采用終端滅菌的培養(yǎng)基，那么在使用前應(yīng)進(jìn)行100%的預(yù)培養(yǎng)，以防止外來的污染物帶到環(huán)境中的影響及避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果

實驗室應(yīng)有文件規(guī)定微生物實驗用培養(yǎng)基、原材料及補充添加物的采購、驗收、貯藏、制備、滅菌、質(zhì)量檢查與使用的全過程，并對培養(yǎng)基的驗收、制備、滅菌、貯藏（包括滅菌后）、質(zhì)量控制試驗和使用情況等進(jìn)行記錄，包括培養(yǎng)基名稱、制造商、批號、表觀特性、配制日期和配制人員的標(biāo)識、稱量、配制及分裝的體積、PH值、滅菌設(shè)備及程序等，按處方配置的培養(yǎng)基記錄還應(yīng)包括成分名稱及用量。

  解析：刪除“100%預(yù)培養(yǎng)過程”。

原文鏈接：2020版《中國藥典》9203章節(jié)對培養(yǎng)基要求變化解讀。